重磅发布:海大集团成功研发非洲猪瘟快速检测方法与设备
时间:2019-04-25 来源:海大集团 作者:佚名
广东海大畜牧兽医研究院兽医诊断制品GMP生产车间继2019年1月静态验收后,经单位领导及全体同事不舍昼夜连日奋斗,免疫学类诊断车间(B类)生产线和分子生物学类诊断车间(B类)两条生产线,顺利通过动态验收!
更值得庆贺的是广东海大畜牧兽医研究院开发了非瘟病毒核酸恒温可视化检测诊断技术和基于此技术生产的非瘟快速检测试剂盒,开启了非瘟鉴别诊断和防控的新篇章。这项技术将大大提高非瘟诊断的准确性,有助于非瘟病毒的及时发现、隔离和处理,最大限度的减少非瘟病毒造成的压力和给我们带来的损失。下面对这项检测技术的特点做一个简单的介绍。
1 灵敏度高
能够在猪发病前3-4天检测到目标核酸,即在很低的病毒滴度下就能检出阳性。
8个稀释梯度的样品(1280倍)均可以检出阳性。
(注:通过比色观察,与阳性对照(天蓝色)颜色相同为阳性,与阴性对照(紫色)颜色相同为阴性。)
2 检测成本低,时间短
无需昂贵的仪器和设备,折算为每个样品的检测费用仅60元,整个检测时间只需50分钟。
3 适用性广
检测实用性广,可用于拭子样品、血清样品、组织样品、猪肉生熟制品,饲料等的检测。
4 操作简单
整个操作过程简单易学,主要包括取样,预处理,离心,扩增等几个步骤,比荧光定量PCR更加简单。下面以采集鼻腔拭子为例,做一个简要的说明。
第一步:取样。
采集鼻腔拭子,肛门拭子或其他样品分装于采样管中, 在前处理之前加入拭子保存液(生理盐水)。
第二步:前处理。
往拭子保存管中加入1ml生理盐水摇晃均匀,吸取20ul拭子洗涤液于1.5ml离心管中,加入100ul样品前处理液,上下颠倒10-20次混匀后使用,将离心管放入金属浴上,100℃加热5分钟;
第三步:离心。
将加热后的离心管放入高速微量离心机中5000转离心4分钟(配平),上清液即为待测模板。
第四步:添加待测模板。
向事先配好非瘟反应液(A反应液1ul、B反应液22ul)的PCR 管中分别加入2ul 模板(触底加液),顺序为阴性对照(阴性对照管可不加入模板)、待测样品模板、阳性对照,离心30秒,立即进行扩增反应。
第五步:扩增反应
将PCR管放入金属浴65℃条件下反应40 min。
第六步:结果判定
在一个光线良好的环境(手机拍照开手电筒,效果更好)中观察反应液颜色(建议以白纸为背景)。如果溶液颜色仍为紫色, 则判定为病毒阴性;如果溶液颜色变成天蓝色,则判定为病毒阳性。
5 准确率高
该设备性能稳定,检测准确,经过大型养殖场检测验证,评测检测结果准确率高达99%以上。以下是其中二个检测案例:A养殖场30份组织样品检测准确率为100%;B养殖场92份血清和组织样品的检测准确率为100%。
A养殖场15份阳性组织样品检测结果
A养殖场15份阴性组织样品检测结果
B养殖场46个血清样品检测结果(全阴性)
B养殖场46表个组织样品检测结果(278号、428号为阳性)
当然,为了保证检测的准确性以及防止病原的传播和交叉感染,实验过程中也有很多注意事项,这在我们的产品说明书上将有详细介绍,同时我们线下会配备专门的技术老师指导产品的使用。
看完以上介绍相信大家对恒温可视化检测技术的特点和操作流程都有所了解,如果您要了解更多的信息可以咨询海大动保商城线上客服或者线下技术服务老师。插入商品链接和客服电话。